首先流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水，酸碱液及缓冲液需经过滤后使用，过滤时注意区分水系膜和油系膜的使用范围；还有要注意水相流动相需经常更换（一般不超过2天） ，防止长菌变质；再就是在使用双泵时，A、B、C 、D四相中 ，若所用流动相中有含盐流动相，则A、D（进液口位于混合器下方）放置含盐流动相，B、C（进液口位于混合器上方）放置不含盐流动相；A、B 、C、D四个储液器中其中一个为棕色瓶 ，用于存放水相流动相 。
1、注意试管的洁净问题。
2 、塑料试管的溶解问题。
3、被测样品在试管壁上的吸附问题。
三、样品 ：
2、 用流动相或比流动相弱（若为反相柱 ，则极性比流动相大 ；若为正相柱，则极性比流动相小）的溶剂制备样品溶液 ，尽量用流动相制备样品液 ；
四、进样阀
1、进样量的控制。用进样阀来进样时，阀内的样品环是定量的 ，(一般分析型进样阀的样品环体积为20ul) ，由于进样时，注射到进样阀内的样品溶液在样品环的管路中有径向的速度梯度(即管轴处比管壁处的液流速度快)。因此 ，要想使样品环中充满样品溶液，从而使用进样阀来准确地定量，则必须使进样量大于样品环体积的2倍。如果用注射器来控制进样量 ，则大只能注射样品环体积1/2的量，这样才能防止部分样品由溢流管溢出从而导致定量分析的误差 。
按照上述的步骤操作，可以避免由进样阀引起的污染，从而使干扰峰消除并提高分析结果的准确性。
五、色谱柱 ：
2、 使用符合要求的流动相；
4、 如所用流动相为含盐流动相 ，反相色谱柱使用后，先用水或低浓度甲醇水（如5％甲醇水溶液） ，再用甲醇冲洗。
6、 不要高压冲洗柱子；
六 、流动相(MOBLLE PHASE)的问题
1、流动相的过滤。配制好的流动相在使用前一定要先用0.5um孔径的微孔滤膜来过滤。这是因为溶液中含有很多肉眼难以发现的微小颗粒，如果不把它们滤除掉，就会堵塞泵口、柱头上的过滤器 ，这样就堵塞了流动相的正常通道 ，使色谱柱的阻力增加，柱压升高，柱效下降 。碰到这种情况时，要换用经过滤的流动相，并将堵塞的滤器拆下来浸泡在20%的硝酸水溶液中以超声波清洗机清洗20分钟 ，以除去滤片上的堵塞物 。
七、图谱
以上是呕心沥血的新高效液相色谱仪使用注意事项大全，从几个方面进行了详细讲解。希望大家看完能在日常工作中，对这些事项能够认真对待，做到有问题及时解决，以延长仪器的正常使用期限，发挥仪器性能的大极限。
